第十一章固相膜免疫测定课件.ppt

第10章–植物的磷素营养与磷肥施用(修改)-《土壤肥料学》课件.ppt

第十章 植物的磷素营养与磷肥施用,李晓林材料,第十章 植物的磷素营养与磷肥施用李晓林材料,磷是植物生长发育不可缺少的营养元素之一.它对作物高产及保持品种的优良特性有明显的作用.因此,研究如何提高磷 的利用率也是近年来学术领域的热点,磷,P,

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1、第十一章固相膜免疫测定,第十一章固相膜免疫测定第十一章固相膜免疫测定4.ELISA双抗体夹心法是()A.酶标记特异抗体用于抗原的检测B.先将待测抗原包被于固相载体C.标记一种抗体可检测多种抗原D.能用于半抗原的测定E.属竞争结合测定5.捕获法主要用于何种物质的测定 A.IgM B.IgG C.IgA D.IgD()AA2021/4/272,第十一章固相膜免疫测定第十一章固相膜免疫测定第十一章固相膜免,4.ELISA双抗体夹心法是()A.酶标记特异抗体用于抗原的检测B.先将待测抗原包被于固相载体C.标记一种抗体可检测多种抗原D.能用于半抗原的测定E.属竞争结合测定5.捕获法主要用于何种物质的测定

2、 A.IgM B.IgG C.IgA D.IgD(),A,A,2021/4/27,2,4.ELISA双抗体夹心法是()AA2021/4/2,6、下列哪种方法用一种标记物可检测多种被测物()A.ELISA双抗体夹心法 B.ELISA竞争法C.ELISA间接法 D.ELISA捕获法E.放射免疫测定法7.关于ELISA竟争法,正确的是()A.用于检测抗原 B.被测物与酶标记物的免疫活性各不相同 C.被测物多则标记物被结合的机会少 D.待测管的颜色比参照管的淡表示被测物量少E.结合于固相的酶标抗原量与样品中被测抗原量成正比,C,C,2021/4/27,3,6、下列哪种方法用一种标记物可检测多种被测物(

3、)C,1.每个亲和素能结合多少个分子的生物素A.1 B.2 C.3 D.4 2.生物素分子中与亲和素结合的主要部位是()A.噻吩环 B.咪唑酮环 C.苯环 D.羰基 E.-NH-3.在用生物素标记酶时,酶活性会降低的是A.HRP B.葡萄糖氧化酶 C.-Gal D.AP(),B,D,2021/4/27,4,1.每个亲和素能结合多少个分子的生物素A.1 B.2,第十一章,固相膜免疫分析技术,2021/4/27,5,第十一章固相膜免疫分析技术2021/4/275,掌握：免疫印迹试验熟悉：胶体金免疫技术的方法学种类与原理了解：胶体金与免疫金的制备、其他膜载体免疫分析技术,2021/4/27,6,掌握

4、：免疫印迹试验2021/4/276,一 概述二 免疫层析试验三 免疫渗滤试验四 斑点酶联免疫吸附试验五 免疫印迹试验六 影响固相膜免疫试验的主要因素七 固相膜免疫分析技术的临床应用,2021/4/27,7,一 概述2021/4/277,概述固相膜免疫分析技术(solid phase membrane-based immunoassay)特点:以微孔膜作为固相载体 多孔性,非共价键高度吸附抗原或抗体 易于漂洗,2021/4/27,8,概述2021/4/278,第二节 免疫层析试验,免疫层析试验原理：以NC膜等为固相载体，样品溶液借助毛细作用在层析条上泳动，同时样品中的待测物与层析材料上待测物的受

5、体（抗原或抗体）发生高特异性、高亲和性的免疫反应，层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域，通过目测或仪器检测标记物，在短时间内得到直观的实验结果。,2021/4/27,9,第二节 免疫层析试验免疫层析试验原理：2021/4/27,毛细作用是指浸润液体在细管里升高的现象和不浸润液体在细管里降低的现象,2021/4/27,10,毛细作用2021/4/2710,第二节 免疫层析试验,免疫层析试验分为：胶体金免疫层析试验（ICA）荧光免疫层析试验（GICA）,2021/4/27,11,第二节 免疫层析试验免疫层析试验分为：2021/4/27,二、测定模式（一）胶体金免疫层析试验,1、双抗

6、体夹心法测抗原2、竞争法测小分子抗原3、间接法测抗体,2021/4/27,12,二、测定模式（一）胶体金免疫层析试验1、,胶体金免疫层析试验,A,G,C,B,双抗体夹心法测大分子抗原（阳性，2个条带）,2021/4/27,13,胶体金免疫层析试验AGCB双抗体夹心法测大分子抗原2021/,胶体金免疫层析试验,A,G,C,B,竞争法测小分子抗原（阴性，2个条带）,2021/4/27,14,胶体金免疫层析试验AGCB竞争法测小分子抗原（阴性，2个条带,三 技术要点操作要点：（1）将试剂条标记线一端浸入待测标本中2-5s,或在标本加样处加一定量待检标本,平放于水平桌面上（2）在5-20分钟内观察结果结果判断 夹心法：阴性:1条棕红色指控条带 阳性:出现2条棕红色条带 无棕红色条带出现为试剂失效竞争法：阴性:出现2条棕红色条带。阳性:1条棕红色指控条带,2021/4/27,15,三 技术要点2021/4/2715,第三节 免疫渗滤试验,1 原理在硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中，依次滴加标本、免疫金及洗涤液，因微孔滤膜贴置于吸水材料上故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结