散射免疫比浊法精选课件.ppt

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2、定范围内，透射光被吸收的量与复合物的量呈正相关关系，而复合物的量与抗原抗体量为一定的函数关系。,（一）基本原理,4,一、透射免疫比浊法 当一定波长的光通过抗原抗体反应形成,在抗原或抗体量一定的条件下，可以利用比浊仪在光源的光路方向上测定透射光强度与入射光强度的比值或吸光度，来判断待测抗原的量，这种方法称为透射比浊法。,雅安职业技术学院,在抗原或抗体量一定的条件下，可以利用比浊仪在光源的光路方,透射免疫比浊法光路图,雅安职业技术学院,透射免疫比浊法光路图雅安职业技术学院,待测的抗原抗体复合物分子量足够大。抗原抗体复合物数量足够多。具有充分的反应时间。高亲和力的抗体，并保证抗体过量。,（二）技术要

3、求,雅安职业技术学院,（二）技术要求雅安职业技术学院,自动化免疫比浊分析仪器的问世解决了以上的诸多问题。散射光的强度与复合物的含量成正比，即待测的抗原越多，形成的复合物越多，散射光就越强。第一节 免疫比浊技术原理此外，还要选择适宜的离子强度、pH值等。该法是抗原抗体结合反应的一种动态测定方法。该法具有快速、敏感度及精密度高的特点，其最大优点在于快速，检测不必等到抗原抗体达到平衡，大大节省反应时间，每小时可检测标本数十份；（二）ARRAY分析系统此外，试剂需要加保护剂以提高其稳定性，所用器皿要洁净，避免杂质微粒的干扰。测定的时间依然较长，且随时间延长，抗原抗体复合物有重新结合的趋势，可影响散射值

4、的变化及存在反应本底，在微量测定时，本底的干扰是影响测定准确性的重要因素。离子强度 PBS是较好的反应液。其中光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物的大小和多少密切相关。透射免疫比浊法的灵敏度是单向琼脂扩散方法的510倍，但其与标记免疫分析技术相比还不够高。2抗体的纯度与效价 诊断试剂应尽可能选择高纯度与高效价的抗体。该法是抗原抗体结合反应的一种动态测定方法。该系统的测定方法是透射免疫比浊法的一种改良。该法敏感度高，试剂稳定，个体免疫复合物对结果影响也小，因此结果稳定、可靠，特异性好，精确度高，且不需要特殊的仪器设备，一般分光光度计、自动化生化分析仪或散射比浊仪均可使用。一、主流免疫比浊

5、设备概况另外，要注意保证抗原浓度合适。该法具有快速、敏感度及精密度高的特点，其最大优点在于快速，检测不必等到抗原抗体达到平衡，大大节省反应时间，每小时可检测标本数十份；,透射免疫比浊法的灵敏度是单向琼脂扩散方法的510倍，但其与标记免疫分析技术相比还不够高。因此，透射比浊类的自动分析仪用于免疫测定已趋减少，该测定原理主要用于生化分析仪。,（三）方法学评价,雅安职业技术学院,自动化免疫比浊分析仪器的问世解决了以上的诸多问题。透射,抗原抗体反应曲线,雅安职业技术学院,抗原抗体反应曲线雅安职业技术学院,二、散射免疫比浊法,散射比浊法是指一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液时遇到其中的抗原抗体复合物，光

6、线被粒子颗粒折射而发生偏转，产 生散射光。,（一）基本原理,10,二、散射免疫比浊法（一）基本原理10,透射浊度法和散射浊度法的光路可以实现自动化管理，但用于免疫沉淀反应有很多缺陷，如因为是一次性测定光吸收值，没有考虑单个待测样本的散射效果，可能使测定结果不准确。透射免疫比浊法的灵敏度是单向琼脂扩散方法的510倍，但其与标记免疫分析技术相比还不够高。该法具有快速、敏感度及精密度高的特点，其最大优点在于快速，检测不必等到抗原抗体达到平衡，大大节省反应时间，每小时可检测标本数十份；速率的峰值通过电脑处理系统转换成待测抗原的浓度。此外，试剂需要加保护剂以提高其稳定性，所用器皿要洁净，避免杂质微粒的干扰。第二节 自动化免疫比浊分析离子强度 PBS是较好的反应液。（turbidimetric immunoassay）第一节 免疫比浊技术原理速率散射比浊法峰值出现的时间与抗体浓度及纯度直接相关，需选用抗体纯度及亲和力交高的试剂。该法敏感度高，试剂稳定，个体免疫复合物对结果影响也小，因此结果稳定、可靠，特异性好，精确度高，且不需要特殊的仪器设备，一般分光光度计、自动化生化分析仪或散射比浊仪均可使用。